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    培養微生物的方法步驟

    發布時間:2022-06-22      點擊次數:556
      微生物培養所培養的微生物通常是病菌、細菌、放線菌、真菌等,屬于生物培養的一種。
     
      微生物培養步驟:
     
      1.配置不同濃度的營養液稀釋液:取營養液1ml溶于9ml無菌水中,振蕩 5min配成10%的溶液.
     
      2.將容器口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰用吸管從此溶液中吸取1ml加入到裝有9ml無菌水的試管中.以此類推制成1%,0.1%,0.01%等不同濃度的稀釋液.
     
      3.將試管口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰,左手拿試管,右手托培養皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰).將溶液倒入培養皿中,在各培養皿上標上濃度.
     
      4.將有細菌生長的樣品容器口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰,用接種環挑取菌落上的少量菌體加入10%的營養液中.把接種環放在酒精燈上灼燒滅菌,再次取樣加入盛1%的營養液的培養皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰)中.重復這個操作,將各濃度的營養液接上種.
     
      5.輕輕搖勻接上種的培養皿,置于恒溫箱內37攝氏度保存,3天后就有菌落出現.
     
      微生物培養的基本條件:
     
      1、影響微生物生長的因素
     
      微生物的生長,除了受本身的遺傳特性決定外,還受到外界許多因素的影響。影響微生物生長的因素很多,簡要介紹如下。
     
      1) 營養物濃度
     
      細菌的生長率與營養物的濃度有關:μ=μmax*C/(K+C) ,營養物濃度與生長率的關系曲線是典型的雙曲線。
     
      K值是細菌生長的很基本的特性常數。它的數值很小,表明細菌所需要的營養濃度非常之低,所以在自然界中,它們到處生長。然而營養太低時,細菌生長就會遇到困難,甚至還會死亡。這是因為除了生長需要能量以外,細菌還需要能量來維持它的生存。這種能量稱為維持能。另一方面,隨著營養物濃度的增加,生長率愈接近最大值。
     
      2)溫度
     
      在一定的溫度范圍內,每種微生物都有自已的生長溫度三基點:最低生長溫度、最適生長溫度和最高生長溫度。在生長溫度三基點內,微生物都能生長,但生長速率不一樣。微生物只有處于最適生長溫度時,生長速度才最快,代時最短。超過最低生長溫度,微生物不會生長,溫度太低,甚至會死亡。超過最高生長溫度,微生物也要停止生長,溫度過高。也會死亡。一般情況下,每種微生物的生長溫度三基點是恒定的。但也常受其它環境條件的影響而發生變化。
     
      根據微生物最適生長溫度的不同,可將它們分為三個類型:
     
      a.嗜冷微生物:其是適生長溫度多數在-10℃-20℃之間
     
      b.中溫微生物:其最適生長溫度一般在20℃-45℃之間
     
      c.嗜熱微生物:生長溫度在45℃以上。
     
      3)水分
     
      水分是微生物進行生長的必要條件。芽孢、孢子萌發,首先需要水分。微生物是不能脫離水而生存的。但是微生物只能在水溶液中生長,而不能生活在純水中。各種微生物在不能生長發育的水分活性范圍內,均具有狹小的適當的水分活性區域。
     
      4)氧氣
     
      按照微生物對氧氣的需要情況,可將它們分為以下五個類型。
     
      a.需氧微生物:這類微生物需要氧氣供呼吸之用。沒有氧氣,便不能生長,但是高濃度的氧氣對需氧微生物也是有毒的。很多需氧微生物不能在氧氣濃度大于大氣中氧氣濃度的條件下生長。絕大多數微生物都屬于這個類型。
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